DNA전기 영동은 직접 agarose gel을 만들어 하는 방법과 Pre-made Agarose gel을 구입하여 하는 방법이 있습니다.

 

직접 만드는 방법은 본인이 원하는 형태의 gel을 자유자재로 만들 수 있다는 점과 비용이 저렴하다는 장점이 있고,

 

Pre-made Agarose gel을 사용하는 방법은 agarose gel을 만드는데 필요한 전자레인지나 밸런스, gel cast를 구입할 필요가 없어 agarose gel을 만드는데 필요한 공간과 시간을 대폭 절약할 수 있다는 장점과 전기영동을 자주 하지 않는 실험실의 경우 굳이 대용량의 agarose powder를 구입하지 않아도 되어 연구비를 절감할 수 있다는 장점이 있습니다.

 

 

1. Pre-made Agarose gel을 사용하기 위해서는 일단 성능이 우수하고 저렴한 Pre-made agarose gel을 구입합니다.

 

 

 

 

2. Pre-made agarose gel은 변성이 잘 되지 않아 수명이 아주 깁니다만 포함되어 있는 EtBr이나 SYBR green등은 자외선이나 다른 빛에 민감하게 반응하므로 박스채로 냉장고에 보관하면 수 개월 이상 아주 긴 시간동안 보관할 수 있습니다.

 



 

 

 

3. 박스 안에는 개별 포장으로 Agarose gel이 들어 있으며, 아래 위로 플라스틱 케이스가 싸고 있으며, 약간의 buffer가 포장안에 들어있어 건조를 방지합니다.

 



 

 

 

4. 포장에 표시되어 있는 gel농도와 Dye의 종류, buffer의 종류를 잘 확인 한 후 gel을 꺼내어 비닐 포장을 뜯습니다.

 



 

 

 

5. 포장을 벗기면 아래 위 2장의 plastic cover에 싸여 있는 Agarose gel이 들어 있습니다.

 



 

 

 

6. 상부 커버를 벗깁니다.

 



 

 

 

7. 하부 cast에 gel이 놓은 상태 그대로 전기영동 buffer tank에 넣습니다.

 



 

 

 

8. well이 (-)극 쪽으로 가도록 방향을 잘 확인합니다.

 



 

 

 

9. 준비된 marker와 sample을 차례로 로딩합니다.

 



 

 

 

10. 로딩 완료

 



 

 

 

11. Runing..100V 10~15분

 



 

 

 

12. 전기영동이 끝난 후 gel을 꺼내어 cast와 분리한 후 transilluminator에 올려 놓습니다.

 



 

 

 

14. 사진을 찍기 편하도록 가운데 위치에 똑바로 놓습니다.

 



 

 

 

15. UV등을 켠 후 암상자가 부착된 전기영동사진 전용 카메라로 촬영합니다.

 



 

 

 

16. 사진 촬영 및 분석